鐵是動(dòng)物、植物和微生物生長(zhǎng)的重要元素，該元素 作為多種酶 的 活 性 中 心 并 且 參 與 了 呼 吸、基 因 調(diào) 控、 ＤＮＡ 合成、氧氣運(yùn)輸?shù)榷鄠€(gè)生物過程。與大多數(shù)生 物體一樣，結(jié)核分枝桿菌也需要鐵元素作為酶輔助因 子來參與多種生物過程。鑒于鐵元素對(duì)結(jié)核分枝桿菌的重要性，因此，本研 究以牛結(jié)核分枝桿菌 ＢｆｒＢ蛋白為研究對(duì)象，通過對(duì)牛 結(jié)核分枝桿菌 ＢｆｒＢ蛋白進(jìn)行生物信息學(xué)預(yù)測(cè)分析、表 達(dá)純化及多克隆抗體的制備。ＰＣＲ 儀購(gòu)自杭州柏恒科技有限 公司；恒溫細(xì)菌培養(yǎng)箱購(gòu)自上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公 司；恒溫水浴鍋購(gòu)自沙鷹科學(xué)（上海）儀器有限公司；恒 溫水平搖床購(gòu)自上海智城分析儀器制造有限公司；核 酸電泳儀購(gòu)自北京六一生物科技有限公司。

    在人結(jié)核分枝桿菌中，ＢｆｒＢ蛋白已被證明在鐵元 素的儲(chǔ)存、維 持 鐵 穩(wěn) 態(tài)、致病性等方面發(fā)揮了重要作 用。以 牛 結(jié) 核 分 枝 桿 菌 ＢｆｒＢ 蛋 白 為 研究對(duì)象，對(duì)其進(jìn)行生物信息學(xué)分析、克隆表達(dá)及多克 隆抗體的制備。ＢｆｒＢ蛋白由１８１個(gè)氨基酸組成，是一 種親水性的非分泌蛋白，無跨膜結(jié)構(gòu)域、信號(hào)肽。研究表明，固有無 序 蛋 白 與 病 原 菌 的 致 病 性 密 切 相 關(guān)。